Polysciences全國代理-上海鼎桑
更新時間↟✘：2021-03-10
Polysciences全國代理-上海鼎桑 美國POLYSCIENCES公司成立於1961年╃◕·▩╃，主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學（膠體金,不含甲醛的甲醇等）╃◕·▩╃，病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品╃│₪│。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
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| 產地 | 進口 | 加工定製 | 否 |
|---|
我們公司zui大優勢是強大的採購↟✘：
上海鼎桑生物科技有限公司一家專注於生命科學的科技企業╃◕·▩╃，由在國內科研試劑領域有著豐富從業經驗的技術團隊和管理團隊組建而成╃◕·▩╃，專營進口生物試劑╃◕·▩╃，科學儀器╃◕·▩╃，實驗消耗品等╃│₪│。
公司將不斷把上優質的產品引入國內市場╃◕·▩╃，滿足客戶的需求╃◕·▩╃，公司也將緊跟生命科學的發展╃◕·▩╃，為廣大科研工作者探索生命科學的奧秘奉獻綿薄之力.
Polysciences全國代理-上海鼎桑
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PEI轉染手冊
轉染操作流程↟✘：
1│··✘•、細胞傳代↟✘：
轉染前24h內分離293T細胞至含10％胎牛血清的DMEM培養基 中進行傳代培養╃◕·▩╃，接種密度如下↟✘：
6孔板↟✘：0.5x106細胞
10cm培養皿↟✘：4.0x106細胞
15cm培養皿↟✘：9.0x106細胞
2│··✘•、轉染
轉染前將所有試劑置於室溫╃│₪│。
2.1質粒DNA的稀釋
在無菌試管中╃◕·▩╃，用無血清的DMEM W / O酚紅培養基（濃度為10％）稀釋質粒DNA（ug）╃│₪│。病毒包裝體（psPAX2）↟✘：病毒包膜（pMD2G）和重組質粒DNA的稀釋比例分別為4:2:1╃│₪│。
6孔板↟✘：200ul+3ug的DNA
10cm培養皿↟✘：1ml+7-8ug的DNA
15cm培養皿↟✘：2ml+11-12ug的DNA
2.2 轉染複合體形成
將PEI（1ug/uL）加入已稀釋的總DNA中╃◕·▩╃，PEI與DNA（ug）的混合比率為3:1╃│₪│。加入後立即渦旋混合╃│₪│。
6孔板↟✘：9ul PEI複合體（1ug/ul）=9ug
10cm培養皿↟✘：21ul PEI複合體（1ug/ul）=21ug
15cm培養皿↟✘：33ul PEI複合體（1ug/ul）=33ug
將新增到細胞的DNA/ PEI的混合物在室溫下孵育15分鐘╃│₪│。
4│··✘•、收穫轉染細胞
轉染後48小時內收穫轉染細胞/或病毒上清╃│₪│。
試劑的配製↟✘：
PEI（1ug/ul） Polysciences（CAT＃23966-2配製成儲液↟✘：)
1│··✘•、將無內毒素的無菌水加熱至80℃左右溶解PEI╃◕·▩╃，冷卻到室溫╃│₪│。
2│··✘•、調整pH值至7.0╃◕·▩╃，用0.22um的濾器過濾消毒╃◕·▩╃，分裝後儲存在-20℃╃│₪│。工作液可保持在4℃
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