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Megazyme試劑盒抗性澱粉的測定方法

釋出日期│││:2022-02-23      點選│││:335
  Megazyme試劑盒用於分析a-葡聚糖(包括澱粉✘·,糖原✘·,植物糖原和非抗性麥芽糊精)✘·,一個樣品溶液的重複測定中✘·,吸收值會有0.005至0.010的波動╃☁✘╃✘。當樣品體積為1ml時✘·,這相當於0.05-1ml/L濃度的D-葡萄糖╃☁✘╃✘。如果樣品在準備過程中被稀釋✘·,結果需要乘以稀釋倍數╃☁✘╃✘。例如在樣品準備時✘·,樣品稱重✘·,如10g/L✘·,變異範圍將在0.02至0.05g/100g╃☁✘╃✘。
  抗性澱粉的測定方法│││:樣品使用澱粉葡糖苷酶(AMG)37℃振盪水浴孵育16小時✘·,在這期間✘·,透過兩種酶的聯合作用✘·,非抗性澱粉被溶解✘·,水解成D-葡萄糖✘·,孵育結束後✘·,終止反應╃☁✘╃✘。離心上述溶液✘·,收集上清勿棄✘·,底部殘留絮狀團即為樣品中的RS✘·,用含水的IMS洗滌絮狀團✘·,洗滌後離心✘·,再重複一次洗滌離心✘·,收集離心後獲得的上清✘·,與之前收集的上清混合╃☁✘╃✘。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑測定✘·,這也是對樣品中RS含量的測定✘·,非抗性澱粉(可溶性澱粉)的測定可透過集中的上清液並定容至100mL✘·,再用GOPOD測定D-葡萄糖完成╃☁✘╃✘。
  Megazyme試劑盒檢測原理│││:洗滌後離心✘·,再重複一次洗滌離心✘·,收集離心後獲得的上清✘·,與之前收集的上清混合╃☁✘╃✘。小心倒出試管殘留的液體✘·,將絮狀團置於冰水浴中✘·,加入2MKOH溶解✘·,邊溶解邊用磁力攪拌機劇烈攪拌╃☁✘╃✘。用醋酸鹽緩衝液將溶液調至中性✘·,用AMG將澱粉定量水解為葡萄糖╃☁✘╃✘。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑(GOPOD)測定✘·,這也是對樣品中RS含量的測定╃☁✘╃✘。
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